Magyar
Toggle navigation
Tudóstér
Magyar
Tudóstér
Keresés
Egyszerű keresés
Összetett keresés
CCL keresés
Egyszerű keresés
Összetett keresés
CCL keresés
Böngészés
Saját polc tartalma
(
0
)
Korábbi keresések
Összesen 1 találat.
#/oldal:
12
36
60
120
Rövid
Hosszú
MARC
Részletezés:
Rendezés:
Szerző növekvő
Szerző csökkenő
Cím növekvő
Cím csökkenő
Dátum növekvő
Dátum csökkenő
1.
001-es BibID:
BIBFORM068560
Első szerző:
Kecskeméti Ádám (vegyész)
Cím:
Preparation and characterization of a packed bead immobilized trypsin reactor integrated into a PDMS microfluidic chip for rapid protein digestion / Ádám Kecskeméti, Attila Gáspár
Dátum:
2017
ISSN:
0039-9140
Megjegyzések:
This paper demonstrates the design, efficiency and applicability of a simple, inexpensive and high samplethroughput microchip immobilized enzymatic reactor (IMER) for rapid protein digestion. The IMER containsconventional silica particles with covalently immobilized trypsin packed inside of a poly(dimethylsiloxane)(PDMS) microchip channel (10 mm?1 mm?35 ?m). The microchip consists of 9 different channels, enabling 9simultaneous protein digestions. Trypsin was covalently immobilized using carbodiimide activation, the idealtrypsin/silica particle ratio (i.e. measured mass ratio before the immobilization reaction) was determined. Theamount of immobilized trypsin was 10?15 ?g trypsin for 1 mg silica particle. Migration times of CZE peptidemaps showed good repeatability and reproducibility (RSD%=0.02?0.31%). The IMER maintained its activity for2 months, in this period it was used effectively for rapid proteolysis. Four proteins (myoglobin, lysozyme,hemoglobin and albumin) in a wide size range (15?70 kDa) were digested to demonstrate the applicability ofthe reactor. Their CZE peptide maps were compared to peptide maps obtained from standard in-solutiondigestion of the four proteins. The number of peptide peaks correlated well with the theoretically expectedpeptide number in both cases, the peak patterns of the electropherograms were similar, however, digestion withthe microchip IMER requires only < 10 s, while in-solution digestion takes 16 h. LC-MS/MS peptide mappingwas also carried out, the four proteins were identified with satisfying sequence coverages (29?50%), trypsinautolysis peptides were not detected. The protein content of human serum was digested with the IMER and within-solution digestion.
Tárgyszavak:
Természettudományok
Kémiai tudományok
idegen nyelvű folyóiratközlemény külföldi lapban
Trypsin immobilization
Protein digestion
Peptide mapping
Microchip reactor
Megjelenés:
Talanta. - 166 (2017), p. 275-283. -
További szerzők:
Gáspár Attila (1970-) (vegyész, kémikus)
Pályázati támogatás:
OTKA-111932
OTKA
NTP-NFTÖ-16-0038
Egyéb
GINOP-2.3.2-15-2016-00008
GINOP
GINOP-2.3.3-15-2016-00004
GINOP
Internet cím:
Szerző által megadott URL
DOI
Intézményi repozitóriumban (DEA) tárolt változat
Borító:
Saját polcon:
Rekordok letöltése
1
Corvina könyvtári katalógus v8.2.27
© 2023
Monguz kft.
Minden jog fenntartva.