Találati lista | Tudóstér

001-es BibID:	BIBFORM020961
Első szerző:	Austin, Brian P.
Cím:	The substrate specificity of Metarhizium anisopliae and Bos taurus carboxypeptidases A : insights into their use as tools for the removal of affinity tags / Austin Brian P., Tözsér József, Bagossi Péter, Tropea Joseph E., Waugh David S.
Dátum:	2011
ISSN:	1046-5928
Megjegyzések:	Carboxypeptidases may serve as tools for removal of C-terminal affinity tags. In the present study, we describe the expression and purification of an A-type carboxypeptidase from the fungal pathogen Metarhizium anisopliae (MeCPA) that has been genetically engineered to facilitate the removal of polyhistidine tags from the C-termini of recombinant proteins. A complete, systematic analysis of the specificity of MeCPA in comparison with that of bovine carboxypeptidase A (BoCPA) was carried out. Our results indicate that the specificity of the two enzymes is similar but not identical. Histidine residues are removed more efficiently by MeCPA. The very inefficient digestion of peptides with C-terminal lysine or arginine residues, along with the complete inability of the enzyme to remove a C-terminal proline, suggests a strategy for designing C-terminal affinity tags that can be trimmed by MeCPA (or BoCPA) to produce a digestion product with a homogeneous endpoint.
Tárgyszavak:	Orvostudományok Elméleti orvostudományok idegen nyelvű folyóiratközlemény külföldi lapban
Megjelenés:	Protein Expression And Purification. - 77 : 1 (2011), p. 53-61. -
További szerzők:	Tőzsér József (1959-) (molekuláris biológus, biokémikus, vegyész) Bagossi Péter (1966-2011) (biokémikus, vegyész) Tropea, Joseph E. Waugh, David S.
Internet cím:	Szerző által megadott URL DOI Intézményi repozitóriumban (DEA) tárolt változat
Borító:
Saját polcon:

001-es BibID:	BIBFORM019809
Első szerző:	Boross Péter (biokémikus, vegyész)
Cím:	Improved purification protocol for wild-type and mutant human foamy virus proteases / Péter Boross, József Tőzsér, Péter Bagossi
Dátum:	2006
ISSN:	1046-5928
Megjegyzések:	Wild-type and an active site mutant (S25T) human foamy virus (HFV) proteases were expressed in fusion with maltose binding protein in Escherichia coli. The mutant enzyme contained a Ser to Thr mutation in the -Asp-Ser-Gly- active site triplet of the enzyme, which forms the "fireman's grip" between the two subunits of the homodimeric enzyme. The fusion proteins were purified by affinity chromatography on amylose resin, cleaved with factor Xa, and the processed enzymes were purified by gel filtration under denaturing condition. Refolding after purification resulted in active enzymes with comparable yields. Furthermore, both enzymes showed similar catalytic activities in an oligopeptide substrate representing an HFV Gag cleavage site. However, the S25T mutant showed increased stability in urea unfolding experiment, in a good agreement with the suggested role of the Thr residue of fireman's grip.
Tárgyszavak:	Orvostudományok Elméleti orvostudományok idegen nyelvű folyóiratközlemény külföldi lapban
Megjelenés:	Protein Expression And Purification. - 46 : 2 (2006), p. 343-347. -
További szerzők:	Tőzsér József (1959-) (molekuláris biológus, biokémikus, vegyész) Bagossi Péter (1966-2011) (biokémikus, vegyész)
Pályázati támogatás:	F25807 OTKA F25807 OTKA F34479 OTKA F35191 OTKA T43482 OTKA
Internet cím:	Szerző által megadott URL DOI Intézményi repozitóriumban (DEA) tárolt változat
Borító:
Saját polcon: