CCL

Összesen 3 találat.
#/oldal:
Részletezés:
Rendezés:

1.

001-es BibID:BIBFORM013301
Első szerző:Juhász Tamás (biológus, orvosbiológus)
Cím:Optimalized transient transfection of chondrogenic primary cell cultures / Juhász Tamás, Matta Csaba, Mészár Zoltán, Nagy Georgina, Szíjgyártó Zsolt, Molnár Zsanett, Kolozsvári Bernadett, Bakó Éva, Zákány Róza
Dátum:2010
ISSN:1895-104X
Megjegyzések:We aimed to find a transfection method which provides high efficiency with minimal cytotoxic and/or apoptotic effects for gene transfer into multilayer primary chondrogenic cell cultures. The pEGFP-C1 plasmid was introduced into the cell culture and the efficiency of transformation quantified by GFP fluorescence; the resulting nucleofection was effective but resulted in severe apoptosis. Two liposomal reagents designed to allow transfection into adherent cells did not deliver the plasmids sufficiently and cartilage formation did not occur.In addition, a third liposomal compound, recommended for transfection into either adherent or suspension cell cultures, lead to acceptable transfection efficiency but no cartilage formation. When an amphiphilic reagent was used however, there was acceptable transfection efficiency as well as cartilage formation. The viability of the cells which were transfected using the amphiphilic reagent remained unaffected but proliferation was severely diminished, particularly in the presence of GFP. In addition, the amount of cartilage decreased when GFP was expressed, despite unchanged levels of mRNAs of sox9 and aggrecan core protein, factors reflecting on the efficiency of chondrogenesis. Overexpression of both the constitutively active delta and gamma isoforms of catalytic subunit of calcineurin, a protein phosphatase described as a positive regulator of chondrogenesis, decreased protein level of Sox9 and subsequent cartilage formation. In conclusion, we found that amphiphilic reagent applied prior to the adhesion of cells provides a useful means to transfer plasmids to primary differentiating chondrogenic cells.
Tárgyszavak:Orvostudományok Elméleti orvostudományok idegen nyelvű folyóiratközlemény külföldi lapban
Cartilage differentiation
Mesenchymal cell culture
Chondrifying primary cells
Transfection efficiency
Calcineurin overexpression
Megjelenés:Central European Journal of Biology. - 5 : 5 (2010), p. 572-584. -
További szerzők:Matta Csaba (1980-) (molekuláris biológus, genetikus, angol szakfordító) Mészár Zoltán Mihály (1977-) (agrármérnök) Nagy Georgina (1980-) (orvosbiológus) Szíjgyártó Zsolt (1978-) (vegyész) Molnár Zsanett (1982-) (analitikus) Kolozsvári Bernadett (1982-) (molekuláris biológus, genetikus) Bakó Éva (1958-) (biokémikus) Zákány Róza (1963-) (anatómus-, kötőszövetbiológus)
Internet cím:Szerző által megadott URL
DOI
Intézményi repozitóriumban (DEA) tárolt változat
Borító:

2.

001-es BibID:BIBFORM037161
Első szerző:Kolozsvári Bernadett (molekuláris biológus, genetikus)
Cím:Calcineurin regulates endothelial barrier function by interaction with and dephosphorylation of myosin phosphatase / Kolozsvári B., Bakó É., Bécsi B., Kiss A., Czikora Á., Tóth A., Vámosi Gy., Gergely P., Erdődi F.
Dátum:2012
ISSN:0008-6363
Megjegyzések:AIMS: Calcineurin (CN) influences myosin phosphorylation and alters endothelial barrier function; however, the molecular mechanism is still obscure. Here we examine whether CN controls myosin phosphorylation via mediating the phosphorylation state of Thr696 in myosin phosphatase (MP) target subunit 1 (MYPT1), the phosphorylation site inhibitory to the catalytic activity of MP. METHODS AND RESULTS: Exposure of bovine or human pulmonary artery endothelial cells (BPAECs or HPAECs) to the CN inhibitor cyclosporin A (CsA) induces a rise in intracellular Ca(2+) and increases the phosphorylation level of cofilin(Ser3) and MYPT1(Thr696) in a Ca(2+)-and Rho-kinase-dependent manner. An active catalytic fragment of CN overexpressed in tsA201 cells decreases endogenous MYPT-phospho-Thr696 (MYPT1(pThr696)) levels. Purified CN dephosphorylates (32)P-labelled MYPT1, suggesting direct action of CN on this substrate. Interaction of MYPT1 with CN is revealed by MYPT1 pull-down experiments and colocalization in both BPAECs and HPAECs as well as by surface plasmon resonance (SPR)-based binding studies. Stabilization of the MYPT1-CN complex occurs via the MYPT1(300PLIEST305) sequence similar to the CN substrate-docking PxIxIT-motif. Thrombin induces a transient increase of MYPT1(pThr696) in BPAECs, whereas its combination with CsA results in maintained phosphorylation levels of both MYPT1(pThr696) and myosin. These phosphorylation events might correlate with changes in endothelial permeability since CsA slows down the recovery from the thrombin-induced decrease of the transendothelial electrical resistance of the BPAEC monolayer. CONCLUSION: CN may improve endothelial barrier function via inducing dephosphorylation of cofilin(pSer3) and by interaction with MYPT1 and activating MP through MYPT1(pThr696) dephosphorylation, thereby affecting actin polymerization and decreasing myosin phosphorylation.
Tárgyszavak:Orvostudományok Elméleti orvostudományok idegen nyelvű folyóiratközlemény külföldi lapban
Molekuláris Medicina
Megjelenés:Cardiovascular Research. - 96 : 3 (2012), p. 494-503. -
További szerzők:Bakó Éva (1958-) (biokémikus) Bécsi Bálint (1981-) (vegyészmérnök) Kiss Andrea (1979-) (biokémikus, vegyész) Czikora Ágnes (1982-) (molekuláris biológus) Tóth Attila (1971-) (biológus) Vámosi György (1967-) (biofizikus) Gergely Pál (1947-) (biokémikus) Erdődi Ferenc (1953-) (biokémikus)
Pályázati támogatás:TÁMOP-4.2.2-08/1-2008-0019
TÁMOP
TÁMOP-4.2.1/B-09/1/KONV-2010-0007
TÁMOP
Biomolekuláris interakciók jellemzőinek kvantitatív meghatározása
TÁMOP-4.2.1/B-09/1/KONV-2010-0007
TÁMOP
I. Protein foszfatázok szerepe az in vitro porcdifferenciációban és a mechano-transzdukcióban II. Hypoglykaemiás szerek tervezése a glikogén foszforilázra (foszforilációval és defoszforilációval szabályozott kulcsenzim) ható molekulákkal
TÁMOP-4.2.2/B-10/1-2010-0024
TÁMOP
Internet cím:Szerző által megadott URL
DOI
Intézményi repozitóriumban (DEA) tárolt változat
Borító:

3.

001-es BibID:BIBFORM037160
Első szerző:Kolozsvári Bernadett (molekuláris biológus, genetikus)
Cím:Role of calcineurin in thrombin-mediated endothelial cell contraction / Kolozsvári Bernadett, Szíjgyártó Zsolt, Bai Péter, Gergely Pál, Verin Alexander, Garcia Joe G. N., Bakó Éva
Dátum:2009
ISSN:1552-4922
Tárgyszavak:Orvostudományok Elméleti orvostudományok idegen nyelvű folyóiratközlemény külföldi lapban
Megjelenés:Cytometry. Part A. - 75 : 5 (2009), p. 405-411. -
További szerzők:Szíjgyártó Zsolt (1978-) (vegyész) Bai Péter (1976-) (biokémikus) Gergely Pál (1947-) (biokémikus) Verin, Alexander Garcia, Joe G. N. Bakó Éva (1958-) (biokémikus)
Internet cím:Szerző által megadott URL
DOI
Intézményi repozitóriumban (DEA) tárolt változat
Borító:
Rekordok letöltése1