Találati lista | Tudóstér

001-es BibID:	BIBFORM086257
035-os BibID:	(WOS)000485661500556
Első szerző:	Fidrus Eszter (biotechnológus)
Cím:	Time-dependence of UVB induced cellular mechanisms in cultured human keratinocytes / E. Fidrus, G. Boros, C. Hegedűs, E. A. Janka, G. Emri, K. Karikó, É. Remenyik
Dátum:	2019
ISSN:	0022-202X 1523-1747
Megjegyzések:	UVB-induced cyclobutane pyrimidine dimers (CPDs) are considered to be the main cause of acute sunburn and epidermal carcinogenesis. In humans, these lesions are repaired by nucleotide excision repair, but marsupials and lower organisms present photolyase enzyme which rapidly removes CPDs in a visible light-dependent process (photoreactivation). Previously we established an in vitro pseudouridin-modified mRNA encoding CPD-specific photolyase transfection on human keratinocyte cell lines, which was proved to be a proper method to avoid UVB-induced apoptosis. According to clinical experiences, there is a need for a treatment to diminish the deleterious effects of sunburn when UVB injury has already occurred and the first symptoms appear. Our aim was to determine the time interval after UVB exposure when keratinocyte apoptosis is still preventable. Normal human epidermal keratinocytes were transfected with lipofectamine-complexed, in vitro transcribed mRNA encoding CPD-specific photolyase. Cells were irradiated with 60 mJ/cm2 UVB. At 0, 6, 8 or 12 hours after UVB cells were either exposed to visible light (photoreactivation) or kept in the dark. Viability was measured by Annexin V and propidium iodide dual staining followed by flow cytometry, the relative amount of intracellular CPDs was analyzed by CPD-specific ELISA. Photolyase-mediated CPD removal restored cell viability close to the baseline conditions 0 to 6 hours after UVB treatment. The effect of CPD removal on keratinocyte survival began to decrease 8 hours after the UVB damage. In mRNA-transfected and photoreactivated cells 80% of CPDs were removed at 6 hours post-irradiation. 8 to 12 hours after UVB 40-60% of the CPDs were eliminated. Our results suggest that UV-induced keratinocyte apoptosis can be prevented within 6-8 hours after the UVB injury by the elimination of CPD photolesions. After that point the effect of CPD removal on cell viability is less feasible.
Tárgyszavak:	Orvostudományok Elméleti orvostudományok poszter folyóiratcikk
Megjelenés:	Journal of Investigative Dermatology. - 139 : 9 (2019), p. S311. -
További szerzők:	Boros Gábor Hegedűs Csaba (1988-) (molekuláris biológus) Janka Eszter Anna (1989-) (bőrgyógyász, népegészségügyi szakember) Emri Gabriella (1972-) (bőrgyógyász, allergológus, onkológus) Karikó Katalin (1955-) (biológus, biokémikus) Remenyik Éva (1956-) (bőrgyógyász)
Pályázati támogatás:	K120206 OTKA GINOP-2.3.2-15-2016-00005 GINOP
Internet cím:	DOI Intézményi repozitóriumban (DEA) tárolt változat
Borító:
Saját polcon:

001-es BibID:	BIBFORM086252
Első szerző:	Fidrus Eszter (biotechnológus)
Cím:	Az UVB sugárzást követő, CPD-kapcsolt folyamatok in vitro időfüggő vizsgálata / Fidrus Eszter, Boros Gábor, Hegedűs Csaba, Janka Eszter, Emri Gabriella, Karikó Katalin, Remenyik Éva
Dátum:	2018
ISSN:	0006-7768 2064-261X
Megjegyzések:	Bevezetés: Az UVB sugárzás okozta CPD (ciklobután pirimidin dimer) DNS fotoléziók javítása eukarióta szervezetekben két úton lehetséges:a méhlepényes emlősökben még megtalálható NER (nukleotid excíziós repair) komplex, és az ennél jóval gyorsabb és hatékonyabb, de csak az előbbieknél alacsonyabb rendszertani kategóriákban megtalálható fotoreaktivációs mechanizmus segítségével. Utóbbi folyamat kulcsenzime a fotoliáz, melynek látható (fehér) fénnyel történő aktivációja (fotoreaktivációja) szükséges a keletkezett DNS mutációk javításához. Munkacsoportunkban korábban beállításra került HaCaT immortalizált humán keratinocita és NHEK (normál humán epidermális keratinocita) sejtvonal in vitro pseudouridin-módosított fotoliáz enzimet kódoló mRNS transzfekciója. Kimutattuk, hogy a módszer segítségével jelentősen növelhető a sejtkultúrában a túlélő sejtek aránya UVB besugárzást követően. Mivel a bejutatott fotoliáz enzim fotoreaktivációja, ezáltal a javítási folyamat elindítása az UVB besugárzás megtörténte után is lehetséges, a módszer alkalmasnak bizonyult a CPDfüggő folyamatok időfüggő vizsgálatára. Jelen vizsgálatunkban arra szerettünk volna választ kapni, hogy egy már megtörtént UV károsodás után lehetséges-e, és ha igen, mennyi idő áll rendelkezésre a sejtelhalás megelőzésére a keletkezett DNS léziók javításával. Klinikai szempontból ennek egy bőrt ért, már bekövetkezett UV-károsodás (pl. napégés) utólagos kezelése esetén lehet fontos szerepe. Célkitűzés: Munkánk során a HaCaT és normál humán keratinociták (NHEK) sejtek in vitro szintetizált CPD- fotoliáz mRNS transzfekciója, UVB irradiációja és fotoreaktivációja után a viabilitás meghatározására áramlási citometriát (apoptosis assay), a CPD léziók detektálására CPD-ELISA-t alkalmaztunk. Módszer: Kísérleteink során a HaCaT sejtek életképessége 20mJ/cm2 UVB irradiáció után 24 órával közel 90%-ban javítható volt, amennyiben az UV-okozta DNS léziók közvetlenül a besugárzás után javításra kerültek. 6 órával az irradiációt követő fotoreaktiváció esetén ez az arány körülbelül a felére csökkent. NHEK sejtvonalon 6 és 8 órával az UVB besugárzást követően is jelentős mértékben megakadályozható volt a sejtelhalás. A sejtekben található CPD-k mennyiségi meghatározása során a fotoreaktiváció minden esetben a kontroll (UVB besugárzás nélküli) sejtpopulációval megegyező szintre csökkentette a detektálható CPD léziók számát, abban az esetben is, ha ez a javítás a sejtek túlélését már nem befolyásolta. Eredmények: Eddigi eredményeink arra engednek következtetni, hogy az UVB sugárzás által kiváltott sejtelhalás még legalább 6 órával a károsodás megtörténte után visszafordítható, az általa kiváltott CPD-k eltávolításával. Később az apoptosis a kiváltó ok (DNS károsodás) megszűnte után is végbemegy, ezután már nem lehetséges beavatkozni a folyamatba.
Tárgyszavak:	Orvostudományok Elméleti orvostudományok idézhető absztrakt folyóiratcikk
Megjelenés:	Bőrgyógyászati és venerológiai szemle. - 94 : 6 (2018), p. 288. -
További szerzők:	Boros Gábor (1980-) (biokémikus, molekuláris biológus) Hegedűs Csaba (1988-) (molekuláris biológus) Janka Eszter Anna (1989-) (bőrgyógyász, népegészségügyi szakember) Emri Gabriella (1972-) (bőrgyógyász, allergológus, onkológus) Karikó Katalin (1955-) (biológus, biokémikus) Remenyik Éva (1956-) (bőrgyógyász)
Pályázati támogatás:	GINOP-2.3.2-15-2016-00005 GINOP K120206 OTKA K120206 OTKA
Internet cím:	Szerző által megadott URL Intézményi repozitóriumban (DEA) tárolt változat
Borító:
Saját polcon:

001-es BibID:	BIBFORM086259
035-os BibID:	(WOS)000485661500545
Első szerző:	Hegedűs Csaba (biokémikus, molekuláris biológus)
Cím:	In vitro delivery of CPD-specific photolyase-encoding mRNA prevents UVB-induced mitochondrial changes / C. Hegedus, G. Boros, E. A., Janka, E. Fidrus, T. Juhász, K. Karikó, G. Emri, P. Bai, É. Remenyik
Dátum:	2019
ISSN:	0022-202X 1523-1747
Tárgyszavak:	Orvostudományok Elméleti orvostudományok poszter folyóiratcikk
Megjelenés:	Journal of Investigative Dermatology. - 139 : 9 (2019), p. S309. -
További szerzők:	Boros Gábor (1980-) (biokémikus, molekuláris biológus) Janka Eszter Anna (1989-) (bőrgyógyász, népegészségügyi szakember) Fidrus Eszter (1992-) (biotechnológus) Juhász Tamás (1976-) (biológus, orvosbiológus) Karikó Katalin (1955-) (biológus, biokémikus) Emri Gabriella (1972-) (bőrgyógyász, allergológus, onkológus) Bai Péter (1976-) (biokémikus) Remenyik Éva (1956-) (bőrgyógyász)
Pályázati támogatás:	K120206 OTKA
Internet cím:	Szerző által megadott URL DOI Intézményi repozitóriumban (DEA) tárolt változat
Borító:
Saját polcon:

001-es BibID:	BIBFORM086261
035-os BibID:	(WOS)000410115800622
Első szerző:	Péter M.
Cím:	Time-dependent investigation of UVB-induced cellular mechanisms in human keratinocytes using mRNA encoding cyclobutane pyrimidine dimer-specific photolyase / M. Péter, G. Boros, C. Hegedüs, E. Fidrus, G. Emri, K. Karikó, É. Remenyik
Dátum:	2017
ISSN:	0022-202X 1523-1747
Megjegyzések:	In vitro-synthesized mRNA containing nucleotide modifications has distinguished therapeutic potential to transiently express physiologically important proteins. One such protein is photolyase, which accelerates the removal of UV-induced DNA damages, including cyclobutane pyrimidine dimers (CPD) using the energy of visible light (photoreactivation). Photolyase however is absent in humans. In our previous work, mRNA encoding CPD-specific photolyase has been effectively transfected into HaCaT cells. The encoded protein was visualized in the nuclei. Using CPD-specific ELISA, we showed that CPD-photolyase removed 90% of CPDs in the mRNA transfected cells at one hour after photoreactivation. Here, we found that the mechanism of DNA repair by CPD-photolyase shows a time-dependent behavior. To determine cell viability and apoptosis in photolyase mRNA transfected HaCaT keratinocytes flow cytometry was used. First, cells were exposed to UVB irradiation (20 mJ/cm2), and then photolyase was activated by photoreactivation at 6 h, 12 h and 24 h after UVB exposure. Photoreactivation performed at 6 h or 12 h after UVB irradiation the viability of cells was significantly higher compared to those kept in dark. However, no difference could be observed between the groups when the photoreactivation was delivered at 24 h after UVB irradiation, thus resulting significant keratinocytes death by apoptosis. These findings contribute to better understanding of UVB-induced cellular processes and give an opportunity for developing potential therapeutic agents which is effective not only before but even after UVB irradiation.
Tárgyszavak:	Orvostudományok Elméleti orvostudományok poszter folyóiratcikk
Megjelenés:	Journal of Investigative Dermatology. - 137 : 10 (2017), p. S301. -
További szerzők:	Boros G. Hegedűs Csaba (1988-) (molekuláris biológus) Fidrus Eszter (1992-) (biotechnológus) Emri Gabriella (1972-) (bőrgyógyász, allergológus, onkológus) Karikó Katalin (1955-) (biológus, biokémikus) Remenyik Éva (1956-) (bőrgyógyász)
Pályázati támogatás:	GINOP-2.3.2-15-2016-00005 GINOP K120206 OTKA
Internet cím:	Szerző által megadott URL DOI Intézményi repozitóriumban (DEA) tárolt változat
Borító:
Saját polcon: